对于日常有生物大分子（蛋白、抗体、核酸）浓缩与缓冲液置换（DF）、病毒载体（AAV、慢病毒）或外泌体纯化与洗滤、细胞收获与洗涤、发酵液菌体浓缩或澄清等需求，但又面临全新中试级/科研级切向流过滤（TFF）系统价格高昂、且实验室台面或工艺体量尚未达到大规模工业化程度的生物制药研发、细胞与基因治疗（CGT）及学术科研实验室来说，一台经过专业检测、流路检查、泵头评估与功能校准的二手 KrosFlo（常译作 KrosFlow）切向流过滤（TFF）系统（含天平、蠕动泵及附件），是非常经典、模块化且高性价比的务实之选。KrosFlo 系列是美国 Repligen（瑞普利金，切向流过滤领域的全球技术领导企业）推出的标杆级 TFF 平台，它以全集成化设计（集数控蠕动泵/隔膜泵、多通道数字压力监测、自动背压控制阀、KF Comm 软件于一体）、极其温和的低剪切样品处理方式、可线性放大的工艺参数以及灵活适配中空纤维与平板膜包的双模式著称。尽管该设备属于生物工艺下游核心装备，但凭借其原本工业级的电路与流体控制架构、精准的跨膜压（TMP）与流速调控能力，二手机在专业第三方仪器服务商的标准化整备（泵管检查与更换、压力传感器校验、管路接头紧固与泄漏测试、电机运行平稳性检查、软件通信与参数复验）后，依然能为各类早期药物开发、生物制品纯化、基因治疗载体制备及科研方法开发提供原厂级稳定、可重复且具放大参考价值的工艺数据，是生物药企研发部、CDMO 工艺开发实验室、高校/研究所生物工程专业实验室、细胞治疗初创公司以及质检机构以远低于新机的价格获取核心 TFF 工艺开发能力的理想方案。

核心技术与切向流过滤（TFF）原理

KrosFlo 系统的核心竞争力在于其对切向流过滤（Tangential Flow Filtration, TFF，也称错流过滤）工艺参数的精准控制与自动化执行。与传统死端过滤（Dead-end filtration，液体垂直压过膜，极易快速堵膜）不同，TFF 是让样品液在泵的驱动下平行于过滤膜表面高速切向流动，一部分小于膜孔径的液体（透清液/滤出液，Permeate）垂直透过膜，而大部分样品（回流液/截留液，Retentate）沿膜表面继续循环。这种切向流持续冲刷膜表面，带走可能堵塞膜孔的颗粒或大分子，允许处理高固含量或粘稠样品，并维持长期的高过滤通量，显著提高产物收率。KrosFlo 系统通过数控精密蠕动泵（Peri pump / 蠕动泵）驱动样品，样品仅接触泵管内壁，不接触泵头金属，极低剪切力且无污染风险，只需换泵管即可避免交叉污染，非常适合敏感的生物样品（蛋白、病毒、外泌体）。系统集成了多通道（通常 4 通道：进样压 Pin、回流压 Pout、滤出液压 Pf、跨膜压 TMP）数字压力传感器，精度可达 ±0.01 bar，并配备自动背压控制阀（ABV），可根据设定点自动微调以维持恒定的跨膜压（TMP），这是优化 T

FF 工艺、减少膜污染、保持过滤效率的最关键参数之一。配套的天平（Balance）模块可实时监测进料槽或滤液槽的重量变化，结合软件可实现基于重量的精准洗滤（Diafiltration，如恒定体积洗滤）或终点判断。

智能化软件、模块化流路与工艺模式

该系列设备运行的 KF Comm（或 KF Comm 2）控制软件是其实用性的核心，通常在配套电脑（或内置 PC）上运行。软件提供直观的图形化操作界面与多步程序化运行能力，支持菜单驱动的工艺编辑，内置多种自动化控制模式，如：浓缩（Concentration, C）、洗滤（Diafiltration, D）、浓缩+洗滤+浓缩（C/D/C）等。软件可实时采集、监测并记录时间、各点压力、泵转速（RPM）、流速、天平重量等全参数，数据可导出用于分析报告或工艺放大衔接，并可选配符合 FDA 21 CFR Part 11 的合规包（审计追踪、电子签名等），满足 GMP/GLP 环境需求。在硬件流路配置上，KrosFlo 采用高度模块化设计（如 Repligen 的 ProConnex 流路或通用管路支架），支持快速安装和切换不同规格的中空纤维过滤器（Hollow Fiber Cartridge）或平板膜包（Flat Sheet Cassette），膜截留分子量（MWCO）从 0.2 kDa 到 0.65 µm 可选，处理体积范围依具体型号（如台式 KR2i 约 2 mL–15 L，中试 KMPi 约 100 mL–500 L）覆盖从微升级方法开发到升升级中试制备。这种“一次开发，线性放大”的能力（保持膜通量、切向流速、TMP 等参数一致）是其成为生物工艺从 Lab 到 Pilot 再到 Production 桥梁的关键。

应用场景与采购价值

二手 KrosFlo TFF 系统（含天平、蠕动泵及附件）广泛应用于生物制药下游工艺开发（单抗/融合蛋白/重组蛋白的浓缩与缓冲液置换 DF、脱盐、内毒素去除）、细胞与基因治疗（AAV、慢病毒、腺病毒等载体的纯化、浓缩、洗滤与缓冲液交换；细胞收获后的洗涤与浓缩；外泌体/纳米颗粒的分离与纯化）、微生物与发酵（菌体收获浓缩、发酵液澄清、胞内蛋白释放后澄清）、食品与环境（食品提取液活性成分浓缩、水样微生物/毒素富集）等。对于生物工程教学实验室，它是让学生掌握膜分离原理与下游纯化操作的最佳平台；对于生物药企早期研发或 CDMO 的工艺开发（PD）部门，它以约新机 30%–60% 的价格，提供了 Repligen 全球验证的 TFF 控制架构与数据可靠性。采购时应重点确认：二手机具体型号与规模（如 KR2i 台式还是 KMPi 中试推车式，处理体积与泵流速上限）；蠕动泵头滚轮磨损与电机运行平稳性（空转与带载听异响、看抖动）；压力传感器数值是否准且稳（可用已知气压或水柱简易验证，或要求提供校准记录）；管路、接头、夹具、过滤器支架（中空纤维夹或平板膜包夹）是否齐全无老化裂纹；天平（若有）是否准确及通讯正常；KF Comm 软件能否正常安装运行、通讯控制泵与采集数据（老软件可能适配旧版 Windows 或需特定驱动）；以及后续能否获得第三方维修与零部件支持（如泵头组件、压力传感器、主板、电源、ABV 阀等）。由于 TFF 系统直接接触生物样品且涉泵阀流路，二手机务必确认流路无腐蚀渗漏、泵管为全新或近期更换、且可进行水通量（NWP）与完整性测试。

KrosFlo 切向流过滤（TFF）系统（以 KR2i 台式常见配置为例）主要产品参数表：

注意事项：二手机常因具体型号（KR2i/KMPi/KTF/FS 等）、规模、配置（是否含天平、辅助泵、ABV、不同接口的压力传感器、ProConnex 流路或通用管路夹）、使用年限及保养程度差异较大；蠕动泵头滚轮与泵管为易损件，二手机务必检查滚轮有无深槽磨损、泵管是否老化/变形（建议二手机交接时更换全新合适规格泵管）；压力传感器若接触过腐蚀性液体或膜包破损后样品反冲，可能影响精度或寿命，建议要求提供多点压力校准/验证记录或现场简易测试；流路所有管路、接头、卡箍、过滤器夹持件若有裂纹、老化、不配套，易导致运行漏液，需逐一检查；KF Comm 软件老版本可能需旧版 Windows 或特定运行库，需确认电脑系统与授权；TFF 系统做生物样品前务必进行清洁、消毒/灭菌（如 NaOH 或漂白剂循环）、水通量（NWP）与膜包完整性测试；原厂通常为新机提供保修与验证文件，二手机保修多由第三方卖家提供，泵头、传感器、主板与阀的维修/更换成本需纳入考量。